
Evaluación de calprotectina en materia fecal:

Se determinará la concentración de CF mediante el kit de ELISA dela casa comercial Bühlmann (Basilea, Suiza) utilizando anticuerpo monoclonal contra la calprotectina. Las muestras se prepararán y analizarán de acuerdo con las instrucciones del fabricante en laboratorio Litwin.
La materia fecal deberá ser recolectada de una deposición al azar, no del inodoro o recipientes no controlado, sino en un film de polietileno nuevo y limpio, o en un recipiente plástico limpio tipo tupper lavado con agua corriente y dejado secar. El recipiente no debe contener restos de líquido, ni hipoclorito (lavandina). La muestra no deberá estar contaminada con orina.
Una pequeña parte de la muestra, del tamaño de una cucharada sopera, se retira de film o recipiente con una cuchara o espátula, preferentemente plástica, y se coloca en un recipiente descartable seco sin ningún tipo de líquido, del tipo de orina para urocultivo, cerrado a rosca hermético.
La muestra deberá ser remitida por el paciente preferentemente de inmediato, o en su defecto en el día, conservada en heladera hasta su remisión.
La muestra puede ser conservada en heladera por el Servicio Médico hasta 96 horas de recibida, conservada en heladera entre 2 y 8 grados centígrados.
Deberá ser remitida al laboratorio en recipiente o caja tipo tergopol cerrado con cinta adhesiva plástica, en posición con tapa arriba para evitar derrames internos y pérdidas de material. El traslado debrá respetar la cadena de frío, con conservantes plásticos, no hielo.
Cada recipiente remitido debe estar rotulado con etiqueta autoadhesiva en forma inequívoca, con el número de estudio que debe coincidir con el de la planilla adjunta, el nombre y apellido del paciente y la fecha en que el Servicio Médico recibió la muestra.
Todos los datos deben coincidir con la planilla que debe acompañar el envío. No se procesarán muestras con datos faltantes o ilegibles, no coincidencias entre el número de estudio y los datos del paciente o en malas condiciones de remisión o conservación o sin seguridad biológica (muestras destapadas o volcadas o frascos rotos, etc).

Evaluación de citoquinas en sangre:
Se analizará un panel de 27 citoquinas en muestras de suero. Así, IL-1B, IL-1ra, L-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, FGF básico, Eotaxina, G-CSF, GM-CSF, IFN gamma, IP-10, MCP-1, MIP 1 alfa, MIP 1 beta, PDGF-BB, RANTES, TNF alfa, VEGF fueron cuantificados con el kit comercial Bio-Plex Pro™ï¸ Human Cytokine 27-plex. Los ensayos se llevaron a cabo de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Bio Rad, EE. UU.).
Se obtendrán muestras de sangre venosa periférica de los participantes en el estudio en ayunas al menos 12 h después de la última comida, en tubos de extracción de sangre BD Vacutainer, cod. 367983 con activador de coágulos, gel de polímero. Después de dejar que se coagule durante al menos 30 minutos, pero no más de 120 min, las muestras se centrifugarán a 3000 g durante 10 minutos. El suero se pipeteará en viales Eppendorf de 1,5 mL y se congelarán (-80 °C) hasta su análisis.
